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瑞氏染液的配制方法
发布时间:2019-09-25   点击次数:102次

(1) 瑞氏染液配制:

瑞氏染料 830gm或1g

甲醇(AR) 500ml或600ml

○先称干燥(事先放入温箱干燥过夜)瑞氏染料放置乳钵内,用乳棒轻轻敲碎染料成粉末,再行研磨至听不到研芝麻声即呈细粉末,加少许甘油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸内显“一面镜”光泽,而无染料粉粒沉着。
○再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮,静置片刻,将上层液体倒入一清洁储存瓶内(zui好用甲醇空瓶),再加甲醇研磨,重复数次,至乳钵内染料及甲醇用完为止,摇匀,密封瓶口。
○存室温暗处,储存愈久,则染料溶解、分解就越好,一般储存3个月以上为佳。


(2) 缓冲液:       

●缓冲液作用:
○染色对氢离子浓度是十分敏感的,据观察pH值的改变,可使蛋白质与染料形成的化合物重新离解。
○缓冲液须保持一定的pH使染色稳定,PBS的pH 一般在6.4~6.8,
○偏碱性染料可与缓冲液中酸基起中和作用,偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作用,使pH恒定。


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