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今天分享:ELISA试剂盒实验中常见问题及解决方法
发布时间:2019-12-06   点击次数:157次

一、挑选试剂

挑选质量优良的检测试剂,严格按照试剂阐明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。


二、加样

或许原因:

1)血清或血浆标本别离欠好即进行加样;

2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时刻过长(特别是室内温度较高时); 

3)加完标本再加酶试剂时酶溅起孔外。


解决办法:

1) 标本为血清:将血液先自然寄存1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:有必要运用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后有必要立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时刻后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要储存,则置于-20℃的低温冰箱内。 

2) 加样后及时放入孵箱。 

3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板外表轻拭吸干。 

4) 假如采用AT或其他全自动加样,挑选FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 

5) 标本较多时,请分批操作。


三、 孵育

或许原因:

1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸腾,吸附于孔壁,难于清洗完全; 

2) 孵育时刻人为延伸,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗完全。


解决办法:

1) 贴封片或加盖; 

2) 按阐明过程严格控制操作时刻。

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