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酶联免疫试剂盒一般有3次加样步聚
发布时间:2021-01-26   点击次数:278次

酶联免疫试剂盒是一种敏感性高,特异性强,重复性好的试验诊断办法。由于其试剂安稳、易保存,成果判别较客观等要素,已广泛使用在免疫学查验的各领域中。酶联免疫试剂盒在国内有许多种叫法:例如:ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。

酶联免疫试剂盒中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在ELISA试剂盒板孔的底部,防止加在孔壁上部,并留意不可溅起,不可发生气泡。
 
加标本一般用微量加样器,按规则的量参加板孔中。每次加标本应更换吸嘴,以免发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定需用稀释的血清,可在试管中按规则的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中参加稀释液,酶联免疫试剂盒再在其间参加血清标本,然后在微型震动器上震动1分钟以保证混和。加酶结合物使用液和底物使用液时可用定量多道加液器,使加液进程敏捷完成。在ELISA检测试剂盒中一般有两次抗原抗体反响,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反响的完成需求有必定的温度和时刻,这一保温进程称为温育,有人称之为孵育,在ELISA中似不恰当。
 
ELISA属固相,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,参加板孔中的标本,其间的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的时机,只要贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体触摸。这是一个逐渐平衡的进程,因而需经扩散才干达到反响的结尾。在其后参加的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反响总是需求必定时刻的温育。
 
温育常采用的温度有43℃、37℃、室温文4℃(冰箱温度)等。37℃是试验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在树立ELISA办法作反响动力学研讨时,试验表明,两次抗原抗体反响一般在37℃经1-2小时,酶联免疫试剂盒产品的生成可达高峰。为加速反响,可提高反响的温度,有些试验在43℃进行,但不宜采用更高的温度。抗原抗体反响4℃更为完全,在放射免疫测定中多使反响在冰箱中,以形成多的沉积。但因所需时刻太长,在ELISA中一般不予采用。

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