ELISA试剂盒的温育常选用的温度有43℃、37℃、室温文4℃等。37℃是试验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗体结合的适宜温度。在树立ELISA方法作反响动力学研究时，试验标明，两次抗原抗体反响一般在37℃经1～2小时，产品的生成可达高峰。为加快反响，可进步反响的温度，有些试验在43℃进行，但不宜选用更高的温度。但因所需时刻太长，在ELISA试剂盒中一般不予选用。

ELISA试剂盒实践进程操作技巧：

1）加样器应笔直参加标本，防止刮擦包被板底部，加样进程中防止液体外溅，血清残留在反响孔壁上。

 2）加样器吸头要清洗干净，防止污染，加样次第要与说明书共同，否则可导致成果过错，试验重复性差。

 3）在进行试验前应对试验的物理参数有充沛的了解，如环境温度、反响孵育温度和孵育时刻、洗刷的次数等，要先检查水育箱温度，ELISA试剂盒是否符合要求。

 4）显色液量不行过多，加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下，加显色体系后要避光反响，显色液量不能过多，防止显色过强。

 5）要确保加液量共同，在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好，滴瓶不易控制加液量禁绝，造成显色不一致，判别过错。