兔出血症病毒抗体(RHDV Ab)酶联免疫分析试剂盒
检测范围：96T
使用目的：本试剂盒用于测定兔血清、血浆及相关液体样本中出血症病毒抗体(RHDV Ab) 滴度表达。实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中兔出血症病毒抗体(RHDV Ab) 滴度表达。用纯化的兔出血症病毒(RHDV)抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中出血症病毒抗体(RHDV Ab)相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的出血症病毒(RHDV) 抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中兔出血症病毒抗体(RHDV Ab)滴度表达情况。

试剂盒组成 

兔出血症病毒抗体(RHDV Ab)酶联免疫分析试剂盒标本要求 
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μl。然后将样本以不同的稀释比例上样，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

操作程序总结：

计算和结果判定：
  试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
样本滴度的判定：样本从阳性变为阴性的那个稀释倍数为出血症病毒抗体(RHDV Ab) 滴度表达值。

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兔出血症病毒抗体(RHDV Ab)酶联免疫分析试剂盒注意事项
1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。
2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5．底物请避光保存。
6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm
7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸，使用时必须注意安全。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：2-8℃。
2．有效期：6个月